磷酸化抗體定制

磷酸化抗體定制

翻譯后修飾對蛋白質生物學功能至關重要,在生命現象的許多關鍵調節機制中發揮重要作用,其中蛋白質的磷酸化是最常見的重要翻譯后修飾之一,它參與了體內幾乎所有的細胞活動,與信號傳導,細胞周期,增殖代謝,生長發育以及癌癥機理等諸多生物學問題有密切關系。由于磷酸化蛋白質可以發揮復雜的作用,在細胞水平上準確和精確地定量磷酸化蛋白質對于破譯和了解細胞功能至關重要。

?蛋白質磷酸化修飾是指通過蛋白質磷酸激酶將ATP分子中的磷酸基轉移到蛋白質分子特定位點(Ser、Thr、Tyr殘基等)的過程。有研究表明通過多位點的磷酸化修飾,可以調節蛋白質之間的相互作用。蛋白質磷酸化水平的異常上調或者下調和多種疾病如癌癥、糖尿病、代謝綜合癥、阿爾茲海默癥等的發生密切相關。因此,研究蛋白質磷酸化修飾在多種生物和非生物脅迫領域中的特征對研究蛋白質的功能是十分必要的。

磷酸化抗體主要是針對磷酸化位點制備的,可以特異性識別磷酸化氨基酸位點,檢測蛋白磷酸化水平,對磷酸化蛋白進行定性、定量分析。磷酸化抗體可以用來檢測該蛋白在細胞受到刺激時的磷酸化水平的變化情況,側重于了解該蛋白的一種活性狀態,廣泛應用于免疫學、生物化學、腫瘤學、蛋白質組學,尤其在細胞信號傳導及凋亡、癌癥等生命科學中的研究。

三羊開肽生物科技有限公司提供的磷酸化抗體定制服務包括: 磷酸化多肽設計與合成、動物偶聯免疫、單克隆篩選與建庫、抗體生產與純化、抗體質量驗證與交付。 最終交付的抗體將通過磷酸化多肽與非磷酸化多肽的雙重檢測確認,保證質量合格。 磷酸化抗體可以特異性識別磷酸化的氨基酸位點。磷酸化抗體可以用于區分蛋白質的磷酸化及非磷酸化的存在形式,可用于對磷酸化蛋白進行定性、定量分析。 三羊開肽生物科技有限公司的專業化抗體研發團隊在分析、設計、合成磷酸化多肽及磷酸化抗體制備技術上具有豐富的經驗。我們提供磷酸化多克隆抗體服務和磷酸化單克隆抗體服務。在磷酸化多抗定制服務中,動物免疫后收集的血清先通過磷酸化多肽親和層析柱純化,再將得到的初步純化抗體用非磷酸化多肽親和層析柱吸收,最終交付的磷酸化抗體是經BSA交聯的磷酸化多肽與非磷酸化多肽雙重檢測確認的,進而確保了磷酸化抗體交付質量。


磷酸化多克隆抗體制備(兔)
服務階段 服務內容 交付產品
階段一 設計合成磷酸化多肽 合成10mg磷酸化多肽和5mg非磷酸化多肽 ? 2~3mg多肽(非磷酸化多肽和磷酸化多肽)
? 1~2ml免疫前血清
? 2~5mg磷酸化抗體
? ELISA檢測結果
? 項目報告
階段二 多肽偶聯 合成多肽與載體蛋白偶聯(KLH,BSA)
階段三 抗血清制備 免疫兔子,免疫前采血,免疫四次并采集血清
階段四 小規模純化 血清小樣采集和檢測
階段五 抗原親和純化 制備磷酸化親和純化柱,非磷酸化多肽親和柱去除交叉反應
階段六 檢測 ELISA檢測效價

磷酸化單克隆抗體制備(小鼠)
服務階段 服務內容 交付產品
階段一 設計合成磷酸化多肽 合成10mg磷酸化多肽和5mg非磷酸化多肽 ? 5mg修飾多肽、3mg未修飾多肽和抗體產品
? 50ul免疫前血清
? 2-5株雜交瘤細胞
? 3-8mg純化抗體(2株雜交瘤)ELISA檢測結果
? 亞型鑒定結果
? 完整項目報告
階段二多肽偶聯 合成多肽與載體蛋白偶聯(KLH,BSA)
階段三動物免疫與檢測 免疫小鼠并用磷酸化和非磷酸化多肽進行ELISA檢測
階段四細胞融合 磷酸化多肽顯示出的最佳免疫應答小鼠的脾細胞與骨髓瘤細胞進行細胞融合
階段五增殖與篩選 ELISA檢測出陽性克隆并進行亞克隆
階段六腹水制備及純化 腹水制備,Protein G純化
階段七檢測 ELISA檢測效價
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